[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: تماس با ما ::
:: دوره 6، شماره 4 - ( زمستان 1395 ) ::
جلد 6 شماره 4 صفحات 496-503 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و بیان ژن نانوبادی علیه انتروتوکسین B باکتری استافیلوکوکوس اورئوس
زهرا توسلی1، حمیده روحانی نژاد1، جلیل فلاح مهرآبادی 2
1- پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
2- آزمایشگاه میکروب‌شناسی لیستر، تهران، ایران ، jalil.fallah@gmail.com
چکیده:   (1563 مشاهده)

زمینه و هدف: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس با ترشح انتروتوکسین‌های متعدد باعث بیماری‌های مختلف می‌شود، به همین دلیل روش‌های مؤثر و آسان شناسایی انتروتوکسین­ها موردنیاز است. امروزه غالباً از روش‌های ایمونوشیمیایی برمبنای آنتی‌بادی‌های مونوکلونال استفاده می‌شود. در سرم خون خانواده شترسانان آنتی‌بادی‌های زنجیره سنگین یافت شده که VHH یا نانوبادی نامیده می‌شوند. خصوصیات منحصربه‌فرد این آنتی‌بادی‌ها از قبیل اتصال به مولکول‌های کوچک نظیر توکسین‌ها، آن‌ها را کاندیدهای جذابی برای توسعه ترکیبات دارویی نموده است. برای دستیابی به مولکول VHH علیه انتروتوکسین B استافیلوکوکوس تحقیق حاضر انجام‌ شده ‌است.

مواد و روش‌ها: غنی‌سازی کتابخانه‌ی فاژی به‌منظور جداسازی نانوبادی‌های اختصاصی علیه توکسین در کارهای قبل انجام‌شده بود. در ادامه وکتور pCANTAB 5E  حاوی VHH از باکتری E.coli سویه xl1blue، استخراج و پس از انجام واکنش PCR با پرایمرهای مربوطه، ساب‌کلونینگ در وکتور بیانی (+)pET21a با مکان‌های برش NdeI و XhoI صورت گرفت. ترانسفورماسیون وکتور درون باکتری E.coli سویه بیانی (DE3) BL2I انجام شد. سپس سلول‌ها تحت القای IPTG قرار گرفتند و زمان و شرایط تولید بهینه گردید، درنهایت بیان پروتئین توسط تکنیک SDS-PAGE و وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت.

نتایج: برای تأیید کلونینگ ژن نانوبادی درون وکتور pET21a(+)، توالی نوکلئوتیدی ژن آنالیز و ترانسفورم به باکتری E.coli سویه DE3))BL21 با موفقیت انجام شد. پس از القاء، پروتئین فعال درون سلول توسط روش SDS-PAGE مشاهده و توسط لکه‌گذاری وسترن تأیید شد.

نتیجه‌گیری: در این تحقیق کلونینگ، ساب کلونینگ و بیان ژن نانوبادی انجام شد. تولید این پروتئین نوترکیب می‌تواند گامی مهم در جهت توسعه روش‌های درمانی جدید و یا تولید واکسن علیه انتروتوکسین B باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بردارد.

واژه‌های کلیدی: نانوبادی، VHH، انتروتوکسین B، استافیلوکوکوس اورئوس
متن کامل [PDF 1430 kb]   (457 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: ايمونولوژي
دریافت: ۱۳۹۴/۱۰/۲۹ | پذیرش: ۱۳۹۵/۴/۲۶ | انتشار: ۱۳۹۵/۱۲/۱۸
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Tavassoli Z, Rouhani Nejad H, Fallah Mehrabadi J. Cloning and Expression of Nano Body Gene against Enterotoxin B of Staphylococcus Aureus. J Fasa Univ Med Sci. 2017; 6 (4) :496-503
URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-1004-fa.html
توسلی زهرا، روحانی نژاد حمیده، فلاح مهرآبادی جلیل. کلونینگ و بیان ژن نانوبادی علیه انتروتوکسین B باکتری استافیلوکوکوس اورئوس. مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا. 1395; 6 (4) :496-503

URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-1004-fa.html

دوره 6، شماره 4 - ( زمستان 1395 ) برگشت به فهرست نسخه ها
Journal of Fasa University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.057 seconds with 789 queries by yektaweb 3462