[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: تماس با ما ::
:: دوره 8، شماره 4 - ( زمستان 1397 ) ::
جلد 8 شماره 4 صفحات 1025-1035 برگشت به فهرست نسخه ها
همسانه سازی، بررسی بیان و تخلیص ژن کد کننده پروتئین نوترکیب متشکل از زیرواحدهای اتصالی آنتی‌ژن‌های سطحی CS1 و CS2 از اشرشیا‌‌ کلی انتروتوکسیژنیک (ETEC)
درنا خوب بخت1 ، جعفر امانی 2، شهره زارع3 ، زهرا نورمحمدی1
1- گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم تحقیقات تهران، ایران
2- مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت‌ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله (عج)، تهران، ایران ، jafar.amani@gmail.com
3- گروه ژنتیک و بیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ورامین، ایران
چکیده:   (929 مشاهده)
زمینه و هدف: باکتری اشرشیا کلی انتروتوکسیژنیک از عوامل شایع اسهال است. فاکتورهای کلونیزاسیون و انتروتوکسین‌ها از عوامل اصلی حدت زا در این ارگانیسم هستند. باکتری مذکور از طریق فاکتورهای کلونیزاسیون به سطح سلول‌های اپیتلیال روده متصل می‌شود و انتروتوکسین‌ها را تولید می‌کند که این سموم باعث ترشح بیش‌ازحد مایعات و الکترولیت‌ها در لومن روده می‌شوند که درنهایت منجر به اسهال می‌گردند. به دلیل درمان مشکل و شیوع بالای این بیماری طراحی واکسن علیه این ارگانیسم یکی از اهداف سازمان بهداشت جهانی است. پروتئین CooD – CotD به‌عنوان زیر واحدهای رأسی CS1 و CS2 نقش مهمی را در اتصال باکتری به سلول‌های اپیتلیال روده ایفا می‌کنند. در این مطالعه بیان و تخلیص ژن کد کننده پروتئین کایمریک CooD – CotD به‌عنوان کاندیدای واکسن‌های زیرواحدی انجام شد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه‌، بهینه‌سازی کدونی ژن کایمریک cooDcotD با نرم‌افزار Gene Designer انجام شد. ژن موردنظر با روش PCR تکثیر و در وکتور کلونینگpJET1.2/blunt  همسانه سازی گردید و به‌منظور بیان در وکتور بیانیpET28a  زیرهمسانه‌سازی شد. پروتئین با روش کروماتوگرافی نیکل تخلیص و با وسترن بلات ارزیابی شد.
نتایج: حضور باند 82 کیلودالتونی در ژل SDS-PAGE 10 درصد بیان پروتئین کایمریک CooD – CotD را نشان داد که با روش وسترن بلات تأیید گردید. میزان پروتئین تخلیص شده در این تحقیق 121 میکروگرم در میلی‌لیتر بود.
نتیجه‌گیری: مطالعات بیان و تخلیص پروتئین نشان داد که این پروتئین دارای بیان در میزبان همولوگ است.

 
واژه‌های کلیدی: انتروتوکسیژنیک اشرشیا‌ کلی، CS1، CS2، بیان نوترکیب
متن کامل [PDF 1202 kb]   (115 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی پزشکی
دریافت: ۱۳۹۷/۴/۶ | پذیرش: ۱۳۹۷/۹/۱۹ | انتشار: ۱۳۹۷/۱۲/۲۶
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Khoobbakht D, Amani J, Zare S, Nourmohammadi Z. Cloning and evaluation of gene expression and purification of gene encoding recombinant protein containing binding subunit of coli surface antigens CS1 and CS2 from Enterotoxigenic Escherichia coli. J Fasa Univ Med Sci. 2019; 8 (4) :1025-1035
URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-1770-fa.html

خوب بخت درنا، امانی جعفر، زارع شهره، نورمحمدی زهرا. همسانه سازی، بررسی بیان و تخلیص ژن کد کننده پروتئین نوترکیب متشکل از زیرواحدهای اتصالی آنتی‌ژن‌های سطحی CS1 و CS2 از اشرشیا‌‌ کلی انتروتوکسیژنیک (ETEC). مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا. 1397; 8 (4) :1025-1035

URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-1770-fa.html



دوره 8، شماره 4 - ( زمستان 1397 ) برگشت به فهرست نسخه ها
Journal of Fasa University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.11 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3858