[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: تماس با ما ::
:: زمستان (In Press) ::
برگشت به فهرست مقالات برگشت به فهرست نسخه ها
همسانه سازی، بررسی بیان و تخلیص ژن کد کننده پروتئین نوترکیب متشکل از زیرواحدهای اتصالی آنتی‌ژن‌های سطحی CS1 و CS2 از اشرشیا‌‌ کلی انتروتوکسیژنیک (ETEC)
درنا خوب بخت1 ، جعفر امانی 2، شهره زارع3 ، زهرا نورمحمدی1
1- گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم تحقیقات تهران، ایران
2- مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت‌ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله (عج)، تهران، ایران ، jafar.amani@gmail.com
3- گروه ژنتیک و بیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ورامین، ایران
چکیده:   (253 مشاهده)
زمینه و هدف: باکتری اشرشیا کلی انتروتوکسیژنیک از عوامل شایع اسهال است. فاکتورهای کلونیزاسیون و انتروتوکسین‌ها از عوامل اصلی حدت زا در این ارگانیسم هستند. باکتری مذکور از طریق فاکتورهای کلونیزاسیون به سطح سلول‌های اپیتلیال روده متصل می‌شود و انتروتوکسین‌ها را تولید می‌کند که این سموم باعث ترشح بیش‌ازحد مایعات و الکترولیت‌ها در لومن روده می‌شوند که درنهایت منجر به اسهال می‌گردند. به دلیل درمان مشکل و شیوع بالای این بیماری طراحی واکسن علیه این ارگانیسم یکی از اهداف سازمان بهداشت جهانی است. پروتئین CooD – CotD به‌عنوان زیر واحدهای رأسی CS1 و CS2 نقش مهمی را در اتصال باکتری به سلول‌های اپیتلیال روده ایفا می‌کنند. در این مطالعه بیان و تخلیص ژن کد کننده پروتئین کایمریک CooD – CotD به‌عنوان کاندیدای واکسن‌های زیرواحدی انجام شد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه‌، بهینه‌سازی کدونی ژن کایمریک cooDcotD با نرم‌افزار Gene Designer انجام شد. ژن موردنظر با روش PCR تکثیر و در وکتور کلونینگpJET1.2/blunt  همسانه سازی گردید و به‌منظور بیان در وکتور بیانیpET28a  زیرهمسانه‌سازی شد. پروتئین با روش کروماتوگرافی نیکل تخلیص و با وسترن بلات ارزیابی شد.
نتایج: حضور باند 82 کیلودالتونی در ژل SDS-PAGE 10 درصد بیان پروتئین کایمریک CooD – CotD را نشان داد که با روش وسترن بلات تأیید گردید. میزان پروتئین تخلیص شده در این تحقیق 121 میکروگرم در میلی‌لیتر بود.
نتیجه‌گیری: مطالعات بیان و تخلیص پروتئین نشان داد که این پروتئین دارای بیان در میزبان همولوگ است.

 
واژه‌های کلیدی: انتروتوکسیژنیک اشرشیا‌ کلی، CS1، CS2، بیان نوترکیب
     
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی پزشکی
دریافت: ۱۳۹۷/۴/۶ | پذیرش: ۱۳۹۷/۹/۱۹
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print



برگشت به فهرست مقالات برگشت به فهرست نسخه ها
Journal of Fasa University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3844