[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: تماس با ما ::
:: دوره 4، شماره 4 - ( زمستان 1393 ) ::
جلد 4 شماره 4 صفحات 382-391 برگشت به فهرست نسخه ها
به کارگیری روش سریع و حساس Real time PCR در تشخیص ناخالصی های DNA در اینترفرون نوترکیب
بابک ممنون1، تقی ناصرپور فریور 2، محسن کریمی ارزنانی3
1- مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، قزوین، ایران.
2- مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، قزوین، ایران. ، taghin@yahoo.com
3- بخش پزشکی مولکولی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران.
چکیده:   (6487 مشاهده)
 

زمینه و هدف: اینترفرون‌ها خانواده‌ای از سایتوکاین‌ها هستند که در پاسخ ایمنی به عفونت‌های ویروسی نقش اساسی دارند. در جریان تولید اینترفرون نوترکیب در میزبان بیولوژیک، قطعاتی از اسیدنوکلئیک میزبان وارد محصول می‌شود. به علت وجود محدودیت‌های روش‌های قبلی در تشخیص این آلودگی‌ها، هدف از این مطالعه، استفاده از روش مولکولی سریع و حساس Real time PCR در این ناخالصی‌ها می‌باشد.

  

مواد و روش‌ها: ابتدا با استخراج DNA از میزبان باکتریایی و تهیه رقت‌های متوالی از آن، واکنش Real time PCR به کمک رنگ SYBR Green I انجام گرفت و منحنی استاندارد رسم گردید. پس از استخراج DNA از اینترفرون و انجام واکنش PCR، میزان DNA به کمک منحنی استاندارد، تعیین گردید.

  

نتایج: بررسی‌های انجام شده بر روی چند نمونه اینترفرون، میزان آلودگی DNA را حدود 02/0 پیکوگرم در هر دوز محصول نشان داد. همچنین پرایمرهای طراحی شده در واکنش فوق، هیچ گونه واکنشی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله کننده نشان ندادند.

  

نتیجه‌گیری: مطالعه فوق برای اولین بار در ایران بهینه سازی شد و نشان داد که تکنیک Real time PCR می‌تواند به عنوان یک روش کاربردی و بسیار دقیق در مراکز تولیدی جهت تشخیص ناخالصی‌های DNA ناشی از میزبان، در اینترفرون و سایر محصولات دارویی نوترکیب به کار برده شود.

   
واژه‌های کلیدی: ناخالصی DNA، محصولات دارویی نوترکیب، اینترفرون، Real time PCR، SYBR Green I
متن کامل [PDF 1407 kb]   (2039 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی پزشکی
دریافت: ۱۳۹۳/۳/۲۶ | پذیرش: ۱۳۹۳/۸/۱ | انتشار: ۱۳۹۳/۱۱/۱۳
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Mamnoon B, Naserpour Farivar T, Karimi Arzenani M. Application of Rapid and Sensitive Real Time PCR Technique in Detection of DNA Impurities in Recombinant Interferon. J Fasa Univ Med Sci. 2015; 4 (4) :382-391
URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-237-fa.html

ممنون بابک، ناصرپور فریور تقی، کریمی ارزنانی محسن. به کارگیری روش سریع و حساس Real time PCR در تشخیص ناخالصی های DNA در اینترفرون نوترکیب. مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا. 1393; 4 (4) :382-391

URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-237-fa.html



دوره 4، شماره 4 - ( زمستان 1393 ) برگشت به فهرست نسخه ها
Journal of Fasa University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3731