[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: تماس با ما ::
:: دوره 1، شماره 2 - ( تابستان 1390 ) ::
جلد 1 شماره 2 صفحات 19-23 برگشت به فهرست نسخه ها
کلون، بیان و تخلیص پروتئین سطحی 36 کیلو دالتونی نوترکیب(Omp2b) بروسلا آبورتوس
نازنین بهشتی، اشرف محبتی مبارز 1، بهمن تبرایی، بهمن تبرایی، نیما خرم آبادی، هانیه آقا بابا، امیر بختیاری
1- ، mmmobarez@modares.ac.ir
چکیده:   (15710 مشاهده)

زمینه و هدف: بروسلوز یکی از مهم‌ترین بیماری‌های زئونوز بوده که منجر به ضررهای اقتصادی فراوانی می‌شود. گونه بروسلا، باکتری‌های کوکوباسیل گرم منفی داخل سلولی هستند که قادر به تکثیر در فاگوزوم های ماکروفاژها می‌باشند و در بسیاری از گونه‌های حیوانی و انسان‌ها بیماری ایجاد می‌کنند. پیشگیری و تشخیص، هر دو لازمه ریشه کنی این بیماری می‌باشند. شناسایی و ارزیابی آنتی ژن‌های متفاوت سلول بروسلا در پیشبرد برنامه‌های پیشگیری و تشخیص نقش کلیدی دارند. در این تحقیق تولید و تخلیص پروتئین غشای خارجی 36 کیلو دالتونی نوترکیب (Omp2b) بروسلا آبورتوس به انجام رسید.

مواد و روش‌ها: ژن پروتئین غشای خارجی 36 کیلو دالتونی بروسلا آبورتوس توسط آنزیم PrimeSTAR® HS DNA polymerase تقویت و در pJET1.2 کلون و ژن هدف در (+)pET28a ساب کلون شد. pET28a نوترکیب در E.coli BL21 (DE3) ترانسفورم شد. بیان پروتئین نوترکیب با استفاده از 1 میلی مولار IPTG القا و پروتئین‌های حاصله توسط وسترن بلات بررسی شدند و Omp2b نوترکیب توسط آنتی سرم خرگوشی بروسلا ردیابی شدند.

نتایج: ظهور باند قهوه‌ای-طلایی در جایگاه واکنش در وسترن بلات تأییدی بر کلون و بیان موفقیت آمیز بود. ما با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی، Omp2b نوترکیب را تخلیص کردیم که این روش پروتئین‌های ریفولد شده را بر روی ستون فراهم کرد.

نتیجه گیری: Omp2b با موفقیت کلون، بیان و تخلیص شد. پروتئین‌های نوترکیب توسط آنتی سرم پلی کلونال شناسایی شدند که این امر صحت پروسه را تأیید می‌کند.

واژه‌های کلیدی: بروسلا آبورتوس، کلون، بیان، Omp2b
متن کامل [PDF 1482 kb]   (3102 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بيولوژي سلولی-مولكولي
دریافت: ۱۳۹۱/۱۱/۲۳ | پذیرش: ۱۳۹۲/۶/۲۳ | انتشار: ۱۳۹۲/۶/۲۳
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Behshti N, Mohabati Mobarez A, Tabaraie B, Tabaraie B, Khoramabadi N, Aghababa H et al . Cloning and expression of Brucella outer membrane protein 36kDa (OMP2b) in E. coli. J Fasa Univ Med Sci. 2011; 1 (2) :19-23
URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-60-fa.html

بهشتی نازنین، محبتی مبارز اشرف، تبرایی بهمن، تبرایی بهمن، خرم آبادی نیما، آقا بابا هانیه و همکاران.. کلون، بیان و تخلیص پروتئین سطحی 36 کیلو دالتونی نوترکیب(Omp2b) بروسلا آبورتوس. مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا. 1390; 1 (2) :19-23

URL: http://journal.fums.ac.ir/article-1-60-fa.html



دوره 1، شماره 2 - ( تابستان 1390 ) برگشت به فهرست نسخه ها
Journal of Fasa University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3764